bir kozmid, BAC veya YAC vektörüne klonlanm>fl,
genomik dizilerdir. Bir FISH probu, bir kromozom
kolunun bir parças>, bir kromozom kolunun tama-
m>ndan veya hatta bir kromozomun tamam>ndan
gelen DNA'n>n bir kar>fl>m> olabilir. Probun nas>l
oluflturuldu¤una ba¤l> olarak, bir kromozom kolu-
nun büyük bir parças>na, tüm kol veya tüm bir
kromozoma hibridize olan problar floresan ile bo-
yan>r. Bu gibi prob kar>fl>mlar>, k
kromozomlar>n>n analizi için FISH teknolojisinin
gücünü daha dramatik olarak vurgulamaktad>r.
lirli kromozomal segmentlerin dozaj>n> ölçmek için
kullan>lan k
(cco
ile, di¤er örnekte yeflil bir boya ile iflaretlenir. Bu
iki iflaretli DNA örne¤i eflit miktarlarda kar>flt>r>-
l>r ve
bir kromozom boyunca problardan yay>lan k>rm>z>
floresans>n yeflile oran> ölçülür. E¤er bir kromozo-
mun belirli bir bölgesinden gelen DNA her iki ör-
nekte de eflit bir miktarda FISH sinyalinde, k>rm>-
z>n>n yeflil floresansa oran> 1:1 olacakt>r. E¤er,
normal bir hücre hatt>ndan gelen DNA yeflil ile
iflaretli ve bir kromozomun bir k>sm>nda veya
hepsinde eksik materiali (m
retli ise, k>rm>z>n>n yeflile olan floresan oran>
1:1'den, monozomi vakas>nda 1'den daha aza
do¤ru veya kromozomun bir bölgesinde anormal
gen dozaj> olan trizomi vakas>nda 1'den yukar>
do¤ru bir sapma gösterir. Örne¤in, fiekil 4-11'de
görüldü¤ü gibi, kromozom 18p'nin ucu için k>smi
trizomili bir bireyin dokusundan gelen k>rm>z>
ile iflaretli DNA sonucu, 18p'nin ucundaki k>rm>-
z>n>n yeflile oran> 1.5:1'dir. Benzer olarak e¤er
bu birey, 18p için monosomik olsayd>, k>rm>z>n>n
yeflile olan fleoresans oran> 18p boyunca 0.5:1
olacakt>r.
kullan>labilen fakat kolayl>kla karyotiplendirme
yap>lamayan solid tümörler ve yumuflak doku
sarkomalar> gibi dokularda gen dozundaki de¤i-
flikliklerin bulunmas> için çok kullan>fll>d>r
(Bkz., Bölüm 3). Bu teknik, kanser hücrelerinde
(Bkz., Bölüm 16) kromozomal de¤iflikliklerin
(aberration) çal>fl>lmas>nda genifl bir uygulama
alan> bulmaktad>r.
tiip
olacak flekilde, 24 farkl> kromozom boyama pro-
bunun olmas> zorunludur. Bu kromozom özgül
problar, her bir kromozomun tüm di¤er kromo-
zomlardan büyüklük ve bant karakteristi¤ine
göre (ffllo
özgül DNA örne¤i, farkl> dalga boylar>nda yay>lan
metafaz safhas>ndaki kromozomlar>n boyanmas>nda kullan>lm>flt>r. Her bir boya ile hibridizasyon yo¤unlu¤u, iki farkl> DNA
kayna¤>nda eflit miktarda bulunuyorsa, metafaz kromozomlar>n>n tüm bölgelerinde eflit olacakt>r. Bir hücre hatt>na karfl> ge-
len di¤er bir hücre hatt>nda kromozomlardan bir tanesinin bir segmenti artm>fl veya azalm>fl ise, her bir boya ile olan hibridi-
zasyonunun yo¤unlu¤u 1:1'den sapacakt>r.
iflaretli ve normal DNA yeflil ile iflaretli
yeflile oran>=1.5:1 di¤er alanlarda 1:1
iflaretli ve normal DNA yeflil ile iflaretli
oran>= 0.5:1 di¤er alanlarda 1:1