![]() n>labilir (Bkz., fiekil 4-1). DNA'daki bir genin özel bir parças> (genellikle ekzonlar), bilinen özel pri- merlerin kullan>lmas> ile normal gen dizisinden h>zl> bir flekilde amplifiye edilebilir. Mutant gen, daha sonra kolayl>kla sekanslanabilir (Bu daha sonra tart>fl>lacakt>r.) veya ASO hibridizasyon me- todu ile test edilebilir. Bir hastan>n DNA veya RNA's>ndan bir genomik ya da cDNA kütüphane- sinin oluflturulmas> ve ilgili genin izlenmesi flek- linde çok zahmetli olan bir ifllem, flimdi bir günden daha k>sa bir zaman içinde gerçekleflebilmektedir. nin analizi için de uygulanabilir. s>nda kullan>lan ayn> revers transkriptaz enzi- miyle, tek zincirli bir cDNA sentezlenir (Bkz., fie- gibi PCR primerleri ve DNA polimeraz ilave edilir. iplikli formuyla PCR amplifikasyonu için bir hedef olarak görev yapacakt>r. PCR çok duyarl> bir tek- niktir. PCR bir hastadaki özgül gen dizilerini klonlamadan ve de Southern veya Northern blot'a gerek duyulmadan saptama ve analiz etme imka- n> sa¤lar. Analizler, bir saç kökünden sa¤lanan tek bir hücrede, a¤>z çalkant>s>nda bulunan bir kaç yanak mukozas> hücresinde, dört hücre döne- mindeki bir embriyodan al>nan tek bir blastomer- de, tecavüze u¤ram>fl kurbanlar>n vajinal sürün- tüsünden sa¤lanan tek bir spermde veya suç ma- halindeki kurumufl bir kan damlas>ndan sa¤lanan tek bir hücrede bile yap>labilir. Böylece, doku ör- lunan bir DNA bölgesinin sentezinin tekrarlanarak, bu DNA bölgesinin spesifik ve seçici olarak ço¤almas>. Amplifikasyonun pepefle gelen üç döngüsü, bir hedef dizinin sekiz kop- yas>n>n tamam>n>n sonucunu göster- mektedir. Amplifikasyonun 30 dön- güsünden sonra, dizinin bir milyon- dan fazla kopyas> oluflturulur. |