background image
m>fl yeni DNA kombinasyonlar>n> ifade etmekte-
dir. Herbirinin kendisine ait avantajlar> ve s>n>rla-
malar> olan bir çok vektör, bu amaçla yayg>n ola-
rak kullan>lmaktad>r.
P
LAZM
Plazmidler, bakterilerde veya mayalarda ekstrak-
romozomal olarak (kromozom d>fl>nda) replike ola-
bilen, çembersel ve çift iplikli DNA molekülleridir.
Vektör olarak kullan>lan plazmidler, do¤al türetil-
mifllerdir. DNA moleküllerinden türetilmifllerdir.
Bunlar ilk kez bakterilerde keflfedilmifllerdir.
Çünkü, onlar antibiyotik direnç genleri tafl>makta-
d>rlar ve bir bakteriden di¤erine kolayl>kla geçebi-
lirler; böylece onlar>n antibiyotik direnci mikrobi-
al popülasyon içinde h>zla yay>lmaktad>r. Molekü-
ler klonlama için özel olarak tasarlanan plazmid-
ler genellikle küçüktür (birkaç kb büyüklü¤ünde)
ve bir replikasyon orijini (
E.colide ya da mayada
replikasyon için), bir veya daha fazla say>da seçici
belirleyici (genellikle antibiyotiklere direnç olufltu-
THOMPSON & THOMPSON TIBB< GENET
3
36
6
fi
fie
ek
kiill 4
4 ­
­ 2
2..
Bir insan DNA fragmentinin, bir plazmid klonlama (iki Eco RI bölgesi aras>na) vektörü içine klonlanmas>n>n ba-
samaklar>. "Ori", bakteri hücresinde plazmidin ço¤alabilmesi için DNA replikasyonunun bafllama noktas>n> gösterir. "amp" ve
"tet", amfisilin ve tetrasiklin için direnç veren bakteriyal genleri gösterir. Bakteriler, seçici antibiyotikler içeren besiyerlerinde
üretilir; bu hücreler, klonlanm>fl insan fragmenti tafl>yan plazmid kopyalar> içerir (Fritsc EF, Wozney JM [1944]'den modifiye
edilmifltir. Methods of molecular genetics. In Stamatoyannopoulos G, Nienhurs AW, Majervs PW, Varmus H [eds] The
Molecular Basis of Blood Disease, 2 nd ed. W.B. Saunders, Philadelphia).