background image
midlerin ve BAC'lar>n bir birinden fark>, içlerine
aktar>lacak olan fragmentlerin bakterilere nas>l
verildi¤idir.
M
AYA
Y
APAY
K
ROMOZOMLARI
8. Bölümde aç>klanan gen klonlamas> ve gen hari-
talamas>na ait bir çok yaklafl>m için insan kromo-
zomal DNA's>n>n mümkün olan en büyük parças>-
n> izole etmek bir avantaj olacakt>r. En büyük ka-
pasiteli klonlama vektörü, maya yapay kromozo-
mudur (YAC). Bir tanesi, bir maya telomeri, bir
sentromer ve bir seçici belirleyici içeren ve di¤eri
bir telomer ve ikinci bir seçici belirleyici içeren iki
kol, genomik DNA'n>n k>smi kesilmesi ile olufltu-
rulmufl büyük insan restriksiyon fragmantlerinin
uçlar>na ba¤lan>r; böylece yapay bir kromozom
oluflturulur (fiekil 4-4). Bu fragmentler bir konak-
c>ya
Saccharomyces cerevisiae (ekmek mayas>)
transfer edilir ve orada do¤rusal maya kromozo-
mu gibi replike olur. YAC'lar, normal bir insan
kromozomundan çok daha k>sa, fakat normal bir
maya kromozomu ile yaklafl>k ayn> boyuttaki
1000-2000 kb kadar olan DNA fragmentlerinin
klonlanmas>n> ve izolasyonunu mümkün k>lmak-
tad>r.
Gen Kütüphanelerinin Oluflturulmas>
Moleküler klonlaman>n amac>, daha ileri çal>flma-
lar için özel bir geni veya di¤er DNA dizilerini da-
ha çok miktarda izole etmektir. Bir dizinin büyük
THOMPSON & THOMPSON TIBB< GENET
3
38
8
fi
fie
ek
kiill 4
4 -- 3
3..
Bir bakteriyofajda insan genomundan al>nan DNA kütüphanesinin oluflturulmas>. Afla¤>daki her bir rekombinant
faj partükülü insan DNA's>n>n farkl> fragmentlerini içermektedir. Yüzbinlerce çeflide sahip bu fajlar>n kolleksiyonu insan
DNA's>n>n tamam>n> içermektedir.