de ayn> yönde 5'--3' yönünde okunurlar.
rinin lokalizasyonunu ve s>kl>¤>n> yans>tan tipik
segmentlere ayr>lmaktad>r. Restriksiyon enzimle-
rin bu özelli¤i, rekombinant DNA teknolojisindeki
rolleri ve T>bbi genetikteki uygulamalar> s>ras>nda
iki önemli sorun yaratmaktad>r. Birincisi; örne¤in
genomik DNA örnekleri,
yaklafl>k bir milyon
mektedir. Potansiyel bir kesme bölgesindeki tek
bir baz de¤iflikli¤i bile onun enzim ile tan>nmas>n>
ve kesilmesini iptal ettirir. Bu gibi kesimler, ge-
nomda yaklafl>k olarak bir milyon lokalizasyonda
bir bulunan alt> nükleotidli bu dizilerin araflt>r>l-
mas>na izin vermektedir (Ortalama olarak alt> baz
çiftlik bir tan>ma bölgesi bulunan bir enzim, insan
DNA's>n> her 4
leflmifl olan bu gibi bölgeler, genomun farkl> bölge-
lerinin özel baz kompozisyonunu veya dizisini yan-
s>tmaktad>r. Boyutlar>, bir kaç baz çiftinden bir
milyondan daha fazla baz çiftine kadar de¤iflebilen
EcoRI segmentleri gözlenmektedir.
bafllang>ç noktalar> hariç ayn> tek zincirli yap>fl-
birbirine komplementer 4 bazl>k bölge, birbirleri
ile iliflki kurabilir ve bunu D
mas> takip eder. Bu ligasyon, bir ucu bir DNA kay-
na¤>ndan di¤er ucu farkl> bir kaynaktan gelmifl bir
rekombinant DNA molekülü yarat>r (fiekil 4-2).
EcoRI gibi bir çok restriksiyon enzimi k>sa ç>k>nt>-
lar oluflturur; di¤erleri ise her iki zinciri ayn> nok-
tadan keser ve küt uçlar oluflturur. DNA ligaz, bu
molekülleri de birlefltirebilir.
nakç>da, kendili¤inden replike olabilen ve analiz-
ler için saf formda izole edilebilen bir DNA mole-
külüdür.
ne klonlanmas>, klonlanan segmentin vektör mole-
külü içinde ço¤almas>n> sa¤lamaktad>r. Bakteri
veya maya konakç> hücreleri laboratuvarda s>n>r-
s>z miktarda üretilebilece¤inden ve replike olan
vektörlerde her hücrede yüksek say>da kopyalar
verebilece¤inden ilgili DNA dizileri çok miktarda
elde edilebilir. Özel bir diziye ait sonsuz say>da
kopyan>n elde edilmesi, rre
lo
kasyon yetene¤ine sahip, bakteriyel veya di¤er
DNA molekülleri aras>nda laboratuvarda yarat>l-